خالص سازی آنزیم آلفا- آمیلاز از bacillus sp. جداشده از چشمه آبگرم استان اردیبل

آلفا-آمیلاز آنزیمی است که پیوند های آلفا تشکیل دهنده پلی ساکارید هایی همچون نشاسته و گلیکوژن را شکسته و به گلوکز و مالتوز تبدیل می کند. آلفا-آمیلاز های ترموفیل برای استفاده در صنعت بسیار مهم می باشد. آمیلازهای تجاری بیشتر از باسیلوس یا آسپرژیلوس بدست می آید. علی رغم مشابهت توالی پروتئینی آلفا - آمیلاز در باکتری مزوفیلbacillus lichenifromis باb.stearothermophilus و bacillus amyliquuefaciens آنزیم آمیلازی این سویه مقاومت دمایی بیشتری را نشان می دهد به همین دلیل از آلفا-آمیلاز b.licheniformis به طور گسترده ای در فرایند مایع سازی نشاسته استفاده می شود. در این مطالعه آنزیم آلفا-آمیلاز مقاوم به حرارت از باکتری bacillus sp. جدا شده از آبگرم استان اردبیل خالص سازی و خصوصیات آن شرح داده شد. در نخستین گام مشخص شد که شرایط رشد و تولید آنزیم این باکتری دمای 40 درجه سانتی گراد و ph 9 به صورت بهینه است. سپس آنزیم سویه مورد نظر به وسیله کروماتوگرافی تعویض یونی و فیلتراسیون ژلی جدا و خالص سازی شد. مطالعه sds-page وجود تک باند 56 کیلو دالتونی را نشان داد. مطالعات آنزیم شناسی نشان داد که بهینه دمای فعالیت آنزیم 80 درجه سانتی گراد و ph بهینه آن 7 بود. همچنین حضور عناصر mg2+، ca2+ و+ k باعث تحریک فعالیت آنزیم وmn2+ ، zn2+ ، cu2+ ،3+ al ، fe 2+ ،+ li ، ni + ، co+، sds، edtaباعث کاهش فعالیت آنزیم شد، در حالی که بتا- مرکاپتواتانول و pmfs تاثیری بر روی فعالیت آنزیم نداشتند. مقدار vmax و kmبرای نشاسته به ترتیب 35/7 و 48/3 محاسبه گردید. با توجه به خصوصیات به دست آمده این آنزیم می تواند در صنایع غذایی کاربرد داشته باشد.